黃曲霉毒素B1檢測卡原理:
樣本溶液滴入檢測卡的加樣孔后,樣本溶液中的黃曲霉毒素B1與金標抗體相結合,從而阻止金標抗體與纖維素膜上黃曲霉毒素B1偶聯物結合。當樣本溶液中的黃曲霉毒素B1含量大于檢測*檢測線不顯色,結果為陽性;當樣本溶液中黃曲霉毒素B1含量小于檢測*檢測線顯紫紅色,結果為陰性。
2 技術指標
2.1 試劑卡靈敏度:2ppb(ng/ml)
對樣本的最終檢測限須以試劑卡靈敏度乘以樣本處理的稀釋比例。
2.2 樣本檢測下限:
谷物、飼料、糧油……………10ppb
谷物、飼料(須吹干)………5ppb
3 試劑盒組成
檢測卡…………………………50個/盒
說明書…………………………1份
4 需要的器材和試劑
4.1 儀器:均質器 、振蕩器、離心機、刻度移液管、天平(感量0.01g)
4.2 微量移液器:單道20µl-200µl,100µl-1000µl
4.3 試劑:甲醇,正己烷
5 樣本前處理
5.1 樣本處理前須知:
實驗器具必須潔凈并使用一次性吸頭,以避免污染干擾實驗結果。
5.2 配液:
配液1:樣本提取液
70%甲醇,即V甲醇:V去離子水=7:3。
5.3 樣本前處理步驟:
5.3.1 谷物、飼料
1)稱取2g粉碎樣本于離心管中,再根據不同的檢出限要求按下表加入樣本提取液
檢測下限 | 10ppb | 20ppb | 50ppb | 100ppb |
樣本提取液 | 2ml | 4ml | 10ml | 20ml |
振蕩5分鐘,室溫4000轉/分離心5分鐘。
2)取0.1ml上清,加入0.4ml去離子水,混勻備用。
5.3.2谷物、飼料(須吹干)
若要求檢測下限為5ppb時,可按如下操作:
1)稱取2g粉碎樣本于離心管中,加入4ml樣本提取液,振蕩5分鐘,室溫4000轉/分離心5分鐘;
2)取1ml上層液體在50-60℃條件下用氮氣或空氣吹干;
3)先加入0.25ml70%甲醇溶解剩下的殘留物,劇烈震蕩2分鐘;再加入1ml去離子水,混勻備用。(注意:這一步甲醇與水的加液順序不能顛倒)
稀釋倍數:2.5倍 檢測下限:5ppb
5.3.3糧油(菜油、麻油、色拉油、花生油等)
1)稱取2g樣本于離心管中,再根據不同的檢出限要求按下表加入樣本提取液
檢測下限 | 10ppb | 20ppb | 40ppb | 100ppb |
樣本提取液 | 2ml | 4ml | 8ml | 20ml |
然后加入8ml正己烷,振蕩5分鐘,室溫4000轉/分離心5分鐘。
2)去除上層液體,取0.1ml下層液體加入0.4ml去離子水,混勻備用。
6 實驗步驟
6.1 撕開檢測卡鋁箔包裝袋,取出檢測卡,放于平整、潔凈的臺面上。
6.2 用配套吸管吸取已準備好的樣本液體,緩慢、逐滴的(應避免泡沫產生)滴加2-3滴(約60ul)到加樣孔(S)內。
6.3 室溫下放置8-10分鐘判斷結果。
7 結果判斷
陰性:在檢測窗內,檢測線(T)及對照線(C)同時出現紫紅色線。
陽性:在檢測窗內,只有對照線(C)出現一條紫紅色線。
失效:在檢測窗內,對照線(C)不出現紫紅色線。
8 注意事項
8.1 過期或鋁箔袋破損的產品,均不可使用。
8.2 檢測卡從冰箱中取出時應恢復到室溫后打開,打開的檢測卡應盡快使用以免受潮后失效。
8.3 不要觸摸檢測卡中央的白色膜面。
8.4 取液滴管不可混用,以免交叉污染。
8.5 待檢樣本溶液需清亮、無混濁顆粒、無細菌污染,否則容易導致阻塞、顯色不明顯等異常現象,從而影響實驗結果的判定。
9 貯藏及保存期
儲藏條件:試劑盒于2-30℃干燥環境下保存。
保 質 期:該產品有效期為1年,生產日期見包裝盒。